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商品屬性：

商品詳情：
C166 是從 12 天大的小鼠胚胎卵黃囊中分離出來的內皮細胞系，可用于心血管疾病和干細胞研究。該細胞系應可用于研究內皮細胞分化和確定器官特異性內皮細胞異質性建立的機制。該細胞系可以支持多能造血干細胞的穩(wěn)定增殖，從而產生足夠數量的細胞用于研究其后續(xù)發(fā)育和分化的機制,C166 細胞系是由 F1 胚胎細胞建立的，F1 胚胎是通過將雌性 NMRI/GSF 小鼠與轉基因人類 fes (fps/fes) 原癌基因的雄性 CD-1 小鼠交配獲得的。這些小鼠表達人類 fes (fps/fes) 原癌基因的激活等位基因的多個拷貝，并表現出血管豐富性，進展為多灶性血管瘤。C166 細胞表現出正常的內皮特征，例如放置在基質膠上時重排成管狀結構，并在匯合時保留鵝卵石形態(tài)。細胞組成型表達由抗體 MECA-99 識別的血管尋址蛋白。

1） 來源：小鼠

2） 形態(tài)：內皮細胞樣  貼壁生長

3） 含量：>1x106  細胞數

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途：僅供科研使用。
細胞系培養(yǎng)步驟：

細胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細胞復蘇、細胞傳代和細胞凍存。

細胞復蘇?：

將凍存細胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。

將融化的細胞移入離心管中，加入37℃預熱的DMEM培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

細胞傳代?：

當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。

加入進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。

加入適量DME培養(yǎng)基終止消化，轉移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進行計數，然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。

加入行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。

加入DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。

這些步驟確保了細胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴展，為科學研究提供了大量的細胞樣本?。

?細胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細胞復蘇、細胞傳代和細胞凍存。

細胞復蘇?：

將凍存細胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。

將融化的細胞移入離心管中，加入37℃預熱的DMEM培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

細胞傳代?：

當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。

加入進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。

加入適量DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進行計數，然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

細胞凍存?：

當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。

加入進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。

加入DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。

這些步驟確保了細胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴展，為科學研究提供了大量的細胞樣本?

細胞接收后的處理：

1）C166小鼠血管內皮細胞收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。                      

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1） 準備MEM培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。

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