商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 人軟骨細胞永生化 | 鑒定 | STR鑒定正確 |
貨號 | E-XB6540 | 種屬 | 人 |
生長特性 | 貼壁培養(yǎng) | 細胞形態(tài) | 長梭形細胞，不規(guī)則細胞， |
商品詳情：
軟骨細胞存在于關節(jié)軟骨中，負責分泌II型膠原和其它類型的膠原以及非膠原的細胞外基質(zhì)大分子。成軟骨細胞的增殖和分化與脊椎動物骨架的發(fā)育有著密切的關系。軟骨細胞能分泌和響應一系列的生長因子，包括IGF-1和IL1。體外培養(yǎng)的軟骨細胞是研究軟骨修復和關節(jié)炎病理的有用模型。
1) 細胞來源于人的關節(jié)組織。
2) 細胞鑒定：Ⅱ型膠原(Collagen Ⅱ)免疫熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5) 細胞生長方式：長梭形細胞，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。
細胞系培養(yǎng)步驟：
細胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細胞復蘇、細胞傳代和細胞凍存。
細胞復蘇?：
將凍存細胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。
將融化的細胞移入離心管中，加入37℃預熱的DMEM培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細胞傳代?：
當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DME培養(yǎng)基終止消化，轉移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進行計數(shù)，然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
?細胞凍存?：
當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
這些步驟確保了細胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴展，為科學研究提供了大量的細胞樣本?。
?細胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細胞復蘇、細胞傳代和細胞凍存。
細胞復蘇?：
將凍存細胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。
將融化的細胞移入離心管中，加入37℃預熱的DMEM培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細胞傳代?：
當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進行計數(shù)，然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞凍存?：
當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
這些步驟確保了細胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴展，為科學研究提供了大量的細胞樣本?
細胞接收后的處理：
1）人軟骨細胞永生化收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1） 準備MEM培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠腸神經(jīng)嵴干細胞 | 兔原代海馬神經(jīng)干細胞 |
兔視網(wǎng)膜mulller細胞 | 人原代外周血巨噬細胞 |
兔胎盤間充質(zhì)干細胞 | 人原代甲狀旁腺細胞 |
兔胚胎成纖維細胞 | 人原代關節(jié)滑膜成纖維細胞 |
兔牙齦成纖維細胞 | 人原代輸尿管平滑肌細胞 |
兔結膜囊成纖維細胞 | 大鼠原代造血干細胞 |
兔牙齦上皮細胞 | 兔原代視網(wǎng)膜色素上皮細胞 |
兔臍帶血間充質(zhì)干細胞 | 大鼠原代腎間質(zhì)成纖維細胞 |
豬肺微血管內(nèi)皮細胞 | 兔原代胸腺基質(zhì)細胞 |
兔鼻腔粘膜上皮細胞 | 人原代骨髓間充質(zhì)干細胞 |
兔眼外肌成纖維細胞 | 大鼠原代神經(jīng)膠質(zhì)細胞 |
兔眼微血管內(nèi)皮細胞 | 人原代主動脈血管平滑肌細胞 |
兔視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞 | 人原代真皮微血管周細胞 |
兔視網(wǎng)膜小膠質(zhì)細胞 | 人原代肺癌細胞 |
兔視網(wǎng)膜前體細胞 | 人原代脾臟小梁平滑肌細胞 |
點擊放大
