實驗要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究，作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹：
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
小鼠胚胎細(xì)胞；BABL/C-E | 貼壁生長 | EY-X63747 |
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細(xì)胞名稱 小鼠胚胎細(xì)胞；BABL/C-E
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細(xì)胞系來源于一13-14天的小鼠胚胎組織。2000年由中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立。
培養(yǎng)條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS
傳代方法: 1：2傳代；3-4天一次
傳代情況: P3
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法（-）
冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
Epimedonin L
CAS No.：2215102-38-6
中文名：
分子式：C30H34O5
7基喜樹;7Ethylcampt 訂購|咨詢 緩激肽受體B2(BDKRB2) 規(guī)格： 20mg
柚皮素7O葡萄糖醛苷;Narin 訂購|咨詢 攝食抑制因子1(NES1) 規(guī)格： 10mg
野鷲尾苷;Lridin 訂購|咨詢 攝食抑制因子1(NES1) 規(guī)格： 20mg
鳶尾苷元磺;tectorigenin 訂購|咨詢 賴酰氧酶(LOX) 規(guī)格： 20mg
細(xì)辛醛;2,4,5Trimethoxy 訂購|咨詢 賴酰氧酶(LOX) 規(guī)格： 20mg
香蒲新苷;typhaneoside 訂購|咨詢 賴酰氧酶樣蛋白1(LOXL1) 規(guī)格： 20mg
五味子;schisandrol B 訂購|咨詢 賴酰氧酶樣蛋白1(LOXL1) 規(guī)格： 20mg
特女貞苷;Speuezhenide 訂購|咨詢 賴酰氧酶樣蛋白2(LOXL2) 規(guī)格： 20mg
三尖杉;Cephalotaxlen 訂購|咨詢 賴酰氧酶樣蛋白2(LOXL2) 規(guī)格： 20mg
棗仁皂苷A;Jujuboside A 訂購|咨詢 賴酰氧酶樣蛋白2(LOXL2) 規(guī)格： 20mg
7;Daphnetin 7 訂購|咨詢 賴酰氧酶樣蛋白4(LOXL4) 規(guī)格： 20mg
染料木素;Genistein 訂購|咨詢 賴tRNA合成酶(KARS) 規(guī)格： 20mg
7羥基5,8二氧基黃;7H 訂購|咨詢 賴tRNA合成酶(KARS) 規(guī)格： 20mg
茄;Solanesol 訂購|咨詢 賴特異性去基酶4A(KDM4A) 規(guī)格： 20mg
女貞苷;ligustroflavone 訂購|咨詢 二受體1(OXGR1) 規(guī)格： 20mg
絡(luò)塞定;Rosiridin 訂購|咨詢 二脫氫酶(OGDH) 規(guī)格： 10mg
蘿卜苷;Glucoraphanin 訂購|咨詢 酰刺激蛋白(ASP) 規(guī)格： 20mg
遼東楤木皂苷Ⅴ;Araloside V 訂購|咨詢 ?；视图っ?AGK) 規(guī)格： 20mg
CARM1 蛋白精N甲基4抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Agarose
BTN2A2 嗜乳脂蛋白亞家族2成員A2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml PEG 400
AMPK alpha 1/PRKAA1 腺苷單活蛋白激酶α1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Cholestyramine resin
phosphoAMPK alpha 1(Thr172) 腺苷單活蛋白激酶α1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Sucrose
TP53TG3 p53靶蛋白3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml D(+)Trehalose, dihydrate
TP53TG5 p53靶蛋白5抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Sodium chloride
TSPYL5 特異性Y蛋白樣5抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Guanidine hydrochloride
UBTD1 泛素結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Adonitol
仲高 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Periodicacid 含量:AR，33%
仲鎢銨 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:APT 含量:CP，98%
重堅牢藍(lán) 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:FastblueRRsalt 含量:BR，98%
重酒石銨 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Ammoniumbitartrate 含量:2.5N，1㎜
重酒石鉀 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Potassiumhydrogentartrate 含量:高純，97.5%
重酒石 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Sodiumbitartratemonohydrate 含量:高純，99%
重水 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Deuteriumoxide 含量:AR，99.9%
重碳銨 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Ammoniumbicarbonate 含量:GR，97%
重碳鉀 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:KLyte 含量:BR
重碳 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Sodiumhydrogencarboante 含量:光譜級，99.8%
小鼠胚胎細(xì)胞；BABL/C-E綠膿菌素測定培養(yǎng)基（PDP）規(guī)格：250g用途：用于綠膿桿菌的綠膿菌素測定試驗（GB標(biāo)準(zhǔn)）
無菌采樣袋（12cm*18cm）（帶壓條）規(guī)格：100個/包用途：用于樣品的采樣（小號采樣袋）
HBI單增李斯特氏菌生化鑒定條(GB)規(guī)格：5條/盒用途：用于單增李斯特氏菌的生化鑒定組成：木糖發(fā)酵管、鼠李糖發(fā)酵管、SIM生化管、3%過氧化氫酶試劑、葡萄糖、麥芽糖發(fā)酵管、發(fā)酵管、七葉苷發(fā)酵管、MR-VP(2孔)，共10種生化反應(yīng)。（GB標(biāo)準(zhǔn)）
BIGGY瓊脂規(guī)格：250g用途：用于念珠菌的分離培養(yǎng)和計數(shù)
卻普曼瓊脂規(guī)格：250g用途：用于檢測金黃色葡萄球菌
蠟樣芽孢桿菌顯色平板（9cm）規(guī)格：10個/包詳情介紹
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